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封片和烤片的操作

封片和烤片的操作

   生物切片定制廠家講述封片和烤片的操作。烤片,一般在60℃的溫箱內(nèi)烤片0.5~1小時左右,溫度過高,會引起切片細(xì)胞收縮;時間太短(少于20分鐘),容易造成脫片。脫蠟也相當(dāng)重要,如果脫蠟不干凈,切片不易著色或著色不勻。

所以,脫蠟用的二甲苯要經(jīng)常更換,一般用3道二甲苯,每500ml液體,處理500張切片后更換一次為宜。當(dāng)室溫低于18℃時,必須將切片從溫箱拿出后立即放入二甲苯中脫蠟,或?qū)⒍妆椒湃霚叵鋬?nèi)預(yù)熱(37℃左右)脫蠟,*不得超過60℃。然后經(jīng)高濃度的酒精到低濃度的酒精洗去二甲苯,至水。

   切片脫水應(yīng)從低濃度的酒精到高濃度的酒精,80%酒精1道,95%酒精2道,純酒精2道,(正丁醇1道),二甲苯2道。濃度低的酒精比濃度高的酒精更容易脫水,但也容易使伊紅退色,故脫水時間可短一點(diǎn),每道3-5分鐘,純酒精每道10分鐘。為增加酒精與二甲苯的相融性,可在二甲苯前面增加一道正丁醇;石碳酸-二甲苯液也有此效,但用石碳酸時如不洗凈,可引起切片退色,不利于切片久存,故不作推薦。

   因此我們規(guī)定切片必須濕封,不得用溫箱烤干或電吹風(fēng)吹干后干燥封片。在南方冬春、霉雨季節(jié),封片時要防止口鼻呼出的氣體接觸到切片;在天氣較潮濕的日子里,不宜一次將多張切片取出待封,以免切片“還潮”,形成透明不佳,出現(xiàn)云霧狀水珠。